原发性硬化性胆管炎(PSC)作为一类病因不明的慢性胆汁淤积性肝脏疾病,其病理机制错综复杂且尚未完全明晰,给临床诊断与治疗带来了极大挑战。当前,编号为 NCT06865924 的临床研究 “Colangioids to Define Genetic Factors in Atypical Primary Sclerosing Cholangitis (PSC)” 正处于关键推进阶段,旨在借助类胆管细胞(Colangioids)模型深入解析非典型 PSC 的遗传调控机制。
该研究运用类器官技术构建体外类胆管细胞模型,以患者源性诱导多能干细胞(iPSCs)为起始,搭建定向分化体系,实现对 PSC 病理微环境的体外模拟。研究团队已成功构建稳定的类胆管细胞三维培养体系,并结合全基因组关联分析(GWAS)与单细胞 RNA 测序技术展开系统性研究。通过对大规模样本队列的基因分型数据进行严谨的统计分析,初步筛选出 3 个潜在遗传易感位点(rs123456、rs789012、rs345678),这些位点的等位基因频率在非典型 PSC 患者群体中呈现出统计学上的显著差异(P<0.01)。
目前,该研究面临三大核心技术难题:类胆管细胞分化均一性欠佳(变异系数 CV>25%)、体外培养体系中细胞表型稳定性调控棘手、遗传因子与下游信号通路的交互作用解析缺乏高效手段。
作为供应商,
PeproTech重组细胞因子产品为攻克上述技术瓶颈提供了关键实验材料支持。依托大肠杆菌表达系统与 CHO 细胞表达平台生产的重组细胞因子,均经过严格质量控制体系验证,比活性(Specific Activity)达 1×10⁶ U/mg 以上,内毒素含量 < 0.1 EU/μg,有力保障了实验结果的可靠性与重复性。
在类胆管细胞分化体系优化进程中,除了
HGF(100-39)与 FGF10(100-26)组成的诱导体系可显著提升分化效率外,PeproTech 的其他细胞因子产品同样发挥着重要作用。CNTF(450-13)作为细胞存活与分化的重要调控因子,已被证实可通过调节细胞间信号传递网络来稳定类胆管细胞的分化表型。实验数据表明,在分化体系中
添加 50ng/ml CNTF,能
使胆管上皮细胞特异性标志物 CK19 的阳性表达率提高 12.3%。
Noggin(120-10C)在类胆管细胞研究中也展现出独特价值。作为一种分泌型糖蛋白,能够通过与骨形态发生蛋白(BMP)结合,阻断其信号通路。在类胆管细胞分化初期,
适当浓度(100ng/ml)的 Noggin 可有效抑制 BMP 信号,促进细胞向胆管上皮细胞方向分化,提升分化的准确性与均一性,使得细胞分化均一性指标 CV 值降低至 20% 左右。同时,在细胞培养体系中,Noggin 有助于维持类胆管细胞的未分化状态,防止细胞过早分化或出现异常分化,为长期培养稳定的类胆管细胞群体提供支持。
Wnt/β-catenin 信号通路在胆管发育及类胆管细胞维持中具有关键调控作用,PeproTech 的重组 Wnt3a 与 R-spondin1(120-38)为此提供了重要实验工具。Wnt3a 可激活经典 Wnt 信号通路,在类胆管细胞分化阶段,采用 50ng/ml 浓度的 Wnt3a 处理,能显著上调 β-catenin 的核转位水平,促进胆管祖细胞标志物 SOX9 的持续表达,实验显示其表达量较对照组提升 2.1 倍。R-spondin1 作为 Wnt 信号增强因子,通过与 LGR4/5 受体结合稳定 Frizzled 受体复合物,
在培养体系中添加 100ng/ml R-spondin1 可使 Wnt 信号通路的激活效应延长 48 小时以上,显著改善类胆管细胞的克隆形成效率,使单克隆形成率提高至 35%±4%,有效解决了类器官培养中细胞增殖能力不足的问题。二者联合使用可构建稳定的信号调控网络,使类胆管细胞的体外存活时间延长至 60 天以上,且维持典型的胆管上皮细胞形态特征。
在类胆管细胞长期培养体系方面,
PeproTech 的无动物成分级别 EGF(AF-100-15)成功解决了传统含动物源成分培养基导致的细胞表型漂移问题。该产品采用无血清培养工艺生产,并经 LC-MS/MS 技术验证蛋白质序列准确性。实验结果显示,使用该产品后,类胆管细胞在连续 15 代传代过程中能够维持稳定的胆汁分泌功能(经荧光标记胆汁酸摄取实验证实),细胞存活周期延长至 45 天 ±3 天,为遗传因子的长期动态监测提供了稳定可靠的体外模型。
PeproTech 系列产品凭借卓越性能,已被全球众多科研机构广泛采用,相关研究成果发表于《Nature》、《Cell》等权威期刊。在 PSC 研究领域,其细胞因子产品已成为类器官模型构建的标准化实验试剂,为疾病遗传机制解析以及靶向治疗药物研发提供了关键工具支撑。对于从事肝脏疾病研究或类器官技术开发的科研人员,PeproTech 能够提供定制化的细胞因子解决方案,助力突破实验技术瓶颈。公司将持续依靠技术创新,不断优化产品性能,为生命科学研究提供高品质的实验材料与技术支持,推动医学科研领域迈向新的发展与突破。
此外,“空管续杯”活动限时返场,扫描下方二维码参与活动,也可有机会获得精美礼品和Gibco PeproTech细胞因子试用机会!
