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ITS和ITSE等无血清培养基添加物

发布时间:2020-04-17 17:23 |  点击次数:

 
我们知道,细胞体外培养时需要在培养基中加入血清,以维持细胞的生长和存活。血清,尤其是牛血清,因成分复杂、批间差大和存在病原体污染的可能性等原因广为人们所诟病,而无血清培养基添加物却日益受到科研和生物制药用户的青睐。BioGems(PeproTech旗下品牌)为您提供多种无血清培养基添加物 (见下表)。
 
 
≡ ITS ≡
ITS (Insulin-Transferrin-Selenium 胰岛素-转铁蛋白-硒)是BioGems推出的第一种无血清培养基添加物混合装,除含有胰岛素和转铁蛋白外,还含有另一种无血清培养基必须添加物---硒 (Selenium)。硒是一种微量元素,是谷胱甘肽过氧化物酶、硫氧还蛋白还原酶和其他抗氧化物酶的关键组分。
 
≡ ITSE ≡
 
 
 
≡ 胰岛素//Insulin
 
 
胰岛素(Insulin)由Sir Frederick Grant Banting和Charles H Best于1921年发现,因其特异性由胰岛β细胞分泌而得名。
 
Insulin结构图
 
无血清培养基中,胰岛素为必加组分,它可以促进无血清细胞培养液中细胞的生长,调节细胞对葡萄糖、氨基酸和脂类的摄取、利用和储存,同时抑制糖原、蛋白质和脂肪的分解。需要注意的是,胰岛素对细胞的促生长作用主要是通过其与细胞膜上胰岛素样生长因子(Insulin-like growth factors, IGFs)受体相互作用而介导的;而对细胞的代谢调节作用主要是通过其与细胞膜上的胰岛素受体(Insulin receptor, IR)相互作用而介导的。此外,胰岛素也可通过IGFR与IR的介导,发挥抗凋亡作用。
体外培养不同类型细胞时,无血清培养基中所添加的胰岛素量也有所区别,一般在1-10mg/L之间。
 
≡ 转铁蛋白//Transferrin
 
 
转铁蛋白(Transferrin)于1945年首先在人血清中发现,为无血清培养基必需添加物组分,通过与转铁蛋白受体(Transferrin Receptor , TfR) 相互作用,在无血清细胞培养过程中发挥重要功能。转铁蛋白能与三价铁离子可逆性结合,调节铁离子转运及代谢,维持细胞内的铁平衡。我们对转铁蛋白的转铁作用都很了解,但其实它最重要的意义在于维持细胞的生长和增殖,也就是说它有类似于生长因子的功能。而且,转铁蛋白也是一种重要的胞外抗氧化剂,可以避免细胞外环境中自由基的产生,防止细胞受到伤害。
 
Transferrin结构图
 
BioGems的Transferrin 为Holo-transferrin, Holo-transferrin 除发挥转铁作用外,自身即可作为细胞的铁源,无需在培养基中添加外源性铁。不同细胞,对转铁蛋白的需求量不同,一般原代细胞的推荐浓度为5 -100mg/L;中国仓鼠卵巢细胞(CHO)推荐浓度为10 -50mg/L;杂交瘤和Vero细胞推荐浓度为5 -20mg/L。具体使用浓度还是要根据细胞的种类、状态和想要实现的功能来通过实验确定。
 
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