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你好，我购买了PeproTech公司的重组人TGF-β1，请问开封前离心的温度有没有什么限制的，多少度适合？用DMEM低糖型血清+10%胎牛血清的培养液的可以作为保护剂吗？第一次用，谢谢
提问者： 匿名用户 发布时间：2012-03-29 22:31
最佳答案
老师，您好！感谢您对PeproTech的关注和支持！关于TGF-β1的重悬问题，开封前离心的温度没有什么特殊要求，常温或低温皆可。可以选用低糖型DMEM+10%胎牛血清的培养液做进一步稀释的载体蛋白，但一定要注意在离心后重悬粉末时要严格参照说明书上的溶解方法来溶解。正确的做法是：先用10mM的柠檬酸(此浓度的柠檬酸无需调节pH值即在3.0左右)将TGF-β1冻干粉重悬至0.1-1.0 mg/ml，注意一定要在此浓度范围内，否则蛋白活性不会完全恢复。然后立即用含0.1%的BSA溶液(此为缓冲液，如PBS等)或含10%FBS(小牛血清)的完全培养液将重悬过的蛋白溶液进一步稀释到一定的浓度，此浓度可以是您的工作浓度，也可以是比工作浓度高的浓度。如果短期用，则一般置于2-8oC，活性可维持一周左右。如想长期保存，则需分装冻存于-20oC - -80oC，至少有一年以上的效期。特别注意的是，在用柠檬酸重悬后，一定要立即用BSA或FBS溶液进行稀释，否则因TGF-β1这个蛋白的吸附性极强，很快会粘附在溶解TGF-β1所用管的管壁上。若有进一步的问题，敬请与我们联系！